在基因检测中,对照实验就像是检测的"监考老师",默默监督着每一批实验是否可靠。
阳性对照:已知含有目标序列的样本。在Y染色体检测中,阳性对照是确认含有Y染色体DNA的样本。如果阳性对照没检出,说明PCR体系有问题(试剂失效、仪器故障、操作错误),整批结果不可信。
阴性对照:已知不含目标序列的样本(如女性DNA)。如果阴性对照检出Y染色体信号,说明有污染,整批作废。
空白对照:用纯水代替DNA模板。如果空白对照出现扩增,说明试剂或环境污染。
内参对照:检测一个所有人都有的基因(如β-actin、GAPDH等管家基因),确认DNA提取成功、PCR体系正常。如果内参都没扩增,说明样本DNA质量差,结果不可靠。
对照实验的意义在于:它们不告诉我们客户样本的结果,但告诉我们实验本身是否可信。只有对照全部正常,客户样本的结果才有效。这就像考试时要有标准答案来判卷一样。
PG化验所每批次Y染色体检测都设置全套对照。对照品和客户样本同时提取、同时扩增、同时分析。如果对照异常,即使客户样本出了结果,也不会发报告,而是重做实验。
这些对照增加了试剂成本和工作量,但这是临床检测必须做的。客户看不到对照数据,但每一份报告背后都有对照在"背书"。了解这些,可以理解为什么正规检测比不正规的贵——贵在这些看不见的质控上。PG化验所官网www.pghuayansuo.com有质量控制的介绍。
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