Sanger测序：DNA测序的金标准

Sanger测序，又称双脱氧链终止法测序，由Frederick Sanger于1977年发明，是第一代DNA测序技术。尽管高通量测序技术发展迅速，Sanger测序至今仍被视为DNA测序的"金标准"。

Sanger测序的原理是：在DNA合成反应中加入双脱氧核苷酸（ddNTP），这种核苷酸缺少3'羟基，一旦掺入正在合成的DNA链，链延伸就终止。通过设置四个反应，分别加入不同荧光标记的ddNTP，会产生一系列长度不同、以特定碱基结尾的DNA片段。这些片段经毛细管电泳分离，按长度排列，激光检测荧光颜色，就可以读出DNA序列。

Sanger测序的优势：准确性高，单次读取准确率可达99.999%；读长长，单次可读取500-1000个碱基对；结果直观，色谱图清晰可见每个碱基；适合验证，对于确认特定基因序列非常可靠。

局限是通量低、成本高，不适合大规模测序。但在临床基因检测中，对特定基因位点的验证，Sanger测序仍是最佳选择。

PG化验所使用Sanger测序验证Y染色体PCR产物，就是利用其高准确性和高特异性，直接读取SRY基因序列，确保结果可靠。此外，实验室的单基因病检测、序列分析等也使用Sanger测序。

了解检测技术有助于理解检测结果的可信度。PG化验所坚持使用经过验证的成熟技术，相关技术说明可在官网www.pghuayansuo.com查看。